熒光分光光度計(jì)中熒光以及磷光怎么來(lái)的。大多數(shù)分子在室溫時(shí)均處在電子基態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)，當(dāng)物質(zhì)分子吸收了與它所具有的特征頻率相一致的光子時(shí)，由原來(lái)的能級(jí)躍遷至第一電子激發(fā)態(tài)或第二電子激發(fā)態(tài)中各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)（圖1a、圖b ）。其后，大多數(shù)分子常迅速降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)，在這一過(guò)程中它們和周?chē)耐?lèi)分子或其他分子撞擊而消耗了能量，因而不發(fā)射光（圖1c）。

熒光分光光度計(jì)分子在第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)停留約10-9秒之后,直接下降至電子基態(tài)的各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)，此時(shí)以光的形式釋放出多余的能量，所發(fā)生的光即是熒光(圖1d)。某些熒光物質(zhì)分子在降落到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)后，通過(guò)另一次無(wú)輻射躍遷降落至亞穩(wěn)的三重線態(tài)，又受到熱激活作用再回到第一電子激發(fā)態(tài)的各個(gè)振動(dòng)能級(jí)，最后由第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)降落至電子基態(tài)而發(fā)出熒光。

這種熒光因受激發(fā)光至發(fā)生熒光的時(shí)間較長(zhǎng),故稱(chēng)為遲滯熒光（圖1e、g、h）。產(chǎn)生熒光的第一個(gè)必要條件是該物質(zhì)的分子必須具有能吸收激發(fā)光的結(jié)構(gòu)，通常是共軛雙鍵結(jié)構(gòu)；第二個(gè)條件是該分子必須具有一定程度的熒光效率。所謂熒光效率是熒光物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光量子數(shù)與吸收的激發(fā)光的量子數(shù)的比值

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