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      F96Pro熒光分光光度計(jì)抗干擾原理

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      2016-08-24 00:00


      F96Pro熒光分光光度計(jì)如何區(qū)別熒光、磷光、瑞利光和拉曼光?如何減少散射光對(duì)熒光測(cè)定的干擾?
      熒光:是某些物質(zhì)吸收一定的紫外光或可見(jiàn)光后,基態(tài)分子躍遷到激發(fā)單線態(tài)的各個(gè)不同能級(jí),然后經(jīng)過(guò)振動(dòng)弛豫回到第一激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí),在發(fā)射光子后,分子躍遷回基態(tài)的各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)。這時(shí)分子發(fā)射的光稱為熒光。熒光的波長(zhǎng)比原來(lái)照射的紫外光的波長(zhǎng)更長(zhǎng)。
       
      磷光:是有些物質(zhì)的激發(fā)分子通過(guò)振動(dòng)弛豫下降到第一激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能層后,經(jīng)過(guò)體系間跨越至激發(fā)三重態(tài)的高振動(dòng)能層上,再通過(guò)振動(dòng)弛豫降至三重態(tài)的最低振動(dòng)能層,然后發(fā)出光輻射躍遷至基態(tài)的各個(gè)振動(dòng)能層.這種光輻射稱為磷光。磷光的波長(zhǎng)比熒光更長(zhǎng)。
       
      瑞利光:光子和物質(zhì)分子發(fā)生彈性碰撞時(shí).不發(fā)生能量的交換,僅是光子運(yùn)動(dòng)的方向發(fā)生改變,這種散射光叫做瑞利光,其波長(zhǎng)和入射光相同。
      拉曼光:光子和物質(zhì)分子發(fā)生非彈性碰撞時(shí),在光子運(yùn)動(dòng)方向發(fā)生改變的同時(shí),光子與物質(zhì)分子發(fā)生能量交換,使光于能量發(fā)生改變。當(dāng)光子將部分能量轉(zhuǎn)給物質(zhì)分子時(shí),光子能量減少,波長(zhǎng)比入射光更長(zhǎng);當(dāng)光子從物質(zhì)分子得到能量時(shí),光子能量增加,波氏比入射光為短。這兩種光均稱為拉曼光。
       
      F96Pro熒光分光光度計(jì)為了消除瑞利光散射的影響,熒光的測(cè)量通常在與激發(fā)光成直角的方向上進(jìn)行,并通過(guò)調(diào)節(jié)熒光計(jì)的狹縫寬度來(lái)消除。
      為消除拉曼光的影響可選擇適當(dāng)?shù)娜軇┖瓦x用合適的激發(fā)光波長(zhǎng)。

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